免疫組化(IHC) 作為實(shí)驗(yàn)技能之一,具有特異性強(qiáng),靈敏度高,將形態(tài)、功能和定位密切結(jié)合等優(yōu)勢,現(xiàn)已成為臨床病理的輔助手段。但其實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,存在許多變量,經(jīng)常很難獲得的結(jié)果,因此需要對(duì)一些實(shí)驗(yàn)流程的變量(例如樣品制備、抗原修復(fù)以及抗體孵育時(shí)間等)進(jìn)行調(diào)整實(shí)現(xiàn)優(yōu)化。
IHC實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,包括切片制作(固定,脫水,透明,包埋,切片,貼片,烤片),脫蠟,水化,阻斷,抗原修復(fù),封閉,一抗孵育,二抗孵育,顯色,復(fù)染,封片和分析等,在上次的推文中向您介紹了封閉和一抗孵育兩個(gè)步驟中的常見問題及解析,本次為您帶來的是二抗孵育和顯色過程中的注意事項(xiàng)。文末還附有IHC通關(guān)的秘密——Bioss全新上市的IHC即用型試劑盒,助您一次獲得CNS級(jí)的圖像結(jié)果。
二抗孵育
1.陽性檢測率及著色強(qiáng)度相對(duì)減弱,甚至無染色
2.圖片背景值過高
4.DAB顯色時(shí)間很短(如幾秒或幾十秒)就出現(xiàn)很深的棕褐色
顯色
1.陽性檢測率及著色強(qiáng)度相對(duì)減弱,甚至無染色
2.圖片背景值過高
3.產(chǎn)生深棕至黑色的DAB絮狀或團(tuán)狀沉積
4.陽性檢測率及著色強(qiáng)度相對(duì)增強(qiáng)
5.切片著色不均勻,如一片著色,一片不著色或著色深淺不一
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受篇幅限制,本次IHC實(shí)驗(yàn)過程中的常見問題解析就先分享到這里。如果您還想更深入的學(xué)習(xí)IHC相關(guān)問題,可以繼續(xù)關(guān)注本系列后續(xù)文章。Bioss供應(yīng)科研使用高品質(zhì)IHC抗體及全套配套試劑,為您提供一站式解決方案。如果您在使用我們的產(chǎn)品時(shí)出現(xiàn)任何問題,請(qǐng)隨時(shí)聯(lián)系我們,Bioss資深IHC實(shí)驗(yàn)專家將為您全面講解,深度分析,幫助您輕松解決IHC的“疑難雜癥"!